Санитарно-гигиеническая оценка почвы. Гигиеническая оценка степени загрязнения почвы. Показатели санитарного состояния Яйца гельминтов как показатели санитарного состояния почвы

Нарушение технологий применения удобрений на основе навоза, помета, органогенных отходов городов (осадки сточных вод, твердые бытовые отходы, производственные сточные воды и пр.) нередко ухудшает санитарное состояние почвы и агроценозов. Вследствие усиления физического, химического, биологического загрязнения снижается самоочищающаяся способность почвы, повышается ее токсичность, инфекционный и инвазионный потенциал, негативное влияние на качество продукции растениеводства, окружающей среды, состояние здоровья населения. Оценка санитарного состояния почвы является обязательной при определении и прогнозе степени ее опасности для здоровья и условий проживания населения, разработке мероприятий по рекультивации загрязненных земель, профилактике инфекционной и неинфекционной заболеваемости, при решении очередности санационных мероприятий в рамках комплексных природоохранных программ.

Согласно ГОСТ 17.4.2.01 санитарное состояние почв – это совокупность физико-химических, химических и биологических свойств, которые определяют влияние или потенциальное влияние почвы на здоровье людей. В соответствии с МУ 2.1.7.730-99 санитарное состояние почвы – это совокупность физико-химических и биологических свойств почвы, определяющих качество и степень ее безопасности в эпидемиологическом и гигиеническом отношениях.

Санитарная оценка почв сельскохозяйственных угодий проводится по санитарно-химическим, санитарно-бактериологическим, санитарно-гельминтологическим, санитарно-энтомологическим показателям.

Санитарное обследование земель. Обязательным предварительным этапом оценки санитарного состояния почвы является ее санитарное обследование, включающее составление картосхем, выбор площадок наблюдения.

Пробная площадка должна располагаться на типичном для изучаемой территории месте. При неоднородности рельефа площадки выбирают по элементам рельефа. На территорию, подлежащую контролю, составляют описание с указанием адреса, точки отбора, общего рельефа микрорайона, расположение мест отбора и источников загрязнения, растительного покрова, характера землепользования, уровня грунтовых вод, типа почвы и других данных, необходимых для правильной оценки и трактовки результатов анализов образцов.

При оценке почв сельскохозяйственных территорий пробы почвы отбирают 2 раза в год (весна, осень) с глубины 0-25 см. На каждые 15 га закладывается в среднем не менее одной площадки размером 100-200 м 2 в зависимости от рельефа местности и условий землепользования.

Точечные пробы отбирают в соответствии с ГОСТ 17.4.4.02-84 с соблюдением стерильности для санитарно-микробиологического и гельминтологического анализов на пробной площадке методом конвертов. Методика отбора проб почвы для оценки санитарного состояния почв приведены в табл. 2.75.


Объединенную пробу составляют из равных по объему точечных (не менее 5), отобранных на одной площадке. Объединенные пробы должны быть упакованы в чистые полиэтиленовые пакеты, закрыты, маркированы, зарегистрированы в журнале отбора проб и пронумерованы. На каждую пробу составляется сопроводительный талон, вместе с которым проба вкладывается во второй внешний пакет, что обеспечивает целостность и безопасность их транспортирования. Время от отбора проб до начала их исследований не должно превышать 1 суток.

Подготовка проб к анализу проводится в соответствии с видом анализа. В лаборатории проба освобождается от посторонних примесей, доводится до воздушно-сухого состояния, тщательно перемешивается и делится на части для проведения анализа. Отдельно оставляется контрольная часть от каждой анализируемой пробы (около 200 г) и хранится в холодильнике 2 недели на случай арбитража.

МУ 2.1.7.730-99

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

2.1.7. ПОЧВА, ОЧИСТКА НАСЕЛЕННЫХ МЕСТ, БЫТОВЫЕ
И ПРОМЫШЛЕННЫЕ ОТХОДЫ, САНИТАРНАЯ ОХРАНА ПОЧВЫ

Гигиеническая оценка качества почвы населенных мест

Hygienic evaluation of soil in residential areas


Дата введения 1999-04-05

1. РАЗРАБОТАНЫ: НИИ экологии человека и гигиены окружающей среды им. А.Н.Сысина РАМН (Н.В.Русаков, Н.И.Тонкопий, Н.Л.Великанов), ИМПИТМ им. Е.И.Марциновского МЗ РФ (Н.А.Романенко, Г.И.Новосильцев, Л.А.Ганушкина, В.П.Дремова, Е.П.Хроменкова, Л.В.Гримайло, Т.Г.Козырева, В.И.Евдокимов, О.А.Землянский, В.В.Евдокимов, А.Н.Волищев, В.В.Горохов), ООО "РАДОН" (В.Д.Симонов), ВНИИ природы (Ю.М.Матвеев).

2. УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 5 февраля 1999 г.

3. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

4. С выходом настоящих методических указаний утрачивают силу в части проведения гигиенической оценки степени биологического и химического загрязнения почв "Методические указания по санитарно-микробиологическому исследованию почвы" от 04.08.76 N 1446-76 и "Методические указания по оценке степени опасности загрязнения почвы химическими веществами" от 13.03.87 N 4266-87, а также "Оценочные показатели санитарного состояния почвы населенных мест" от 7 июля 1977 г. N 1739-77.

1. Область применения

1. Область применения

Настоящий документ является нормативно-методической базой для осуществления государственного санитарно-эпидемиологического надзора за санитарным состоянием почв населенных мест, сельскохозяйственных угодий, территорий курортных зон и отдельных учреждений. Документ предназначен для учреждений Государственной санитарно-эпидемиологической службы Российской Федерации и специальных служб федеральных органов исполнительной власти, осуществляющих ведомственный санитарно-эпидемиологический надзор.

Опасность загрязнения почв определяется уровнем ее возможного отрицательного влияния на контактирующие среды (вода, воздух), пищевые продукты и прямо или опосредованно на человека, а также на биологическую активность почвы и процессы самоочищения.

Результаты обследования почв учитывают при определении и прогнозе степени их опасности для здоровья и условий проживания населения в населенных пунктах, разработке мероприятий по их рекультивации, профилактике инфекционной и неинфекционной заболеваемости, схем районной планировки, технических решений по реабилитации и охране водосборных территорий, при решении очередности санационных мероприятий в рамках комплексных природоохранных программ и оценке эффективности реабилитационных и санитарно-экологических мероприятий и текущего санитарного контроля за объектами, прямо или косвенно воздействующими на окружающую среду населенного пункта.

Использование единых методических подходов будет способствовать получению сопоставимых данных при оценке уровней загрязнения почв.

Оценка опасности загрязненной почвы населенных пунктов определяется: 1) эпидемической значимостью; 2) ролью ее как источника вторичного загрязнения приземного слоя атмосферного воздуха и при непосредственном контакте с человеком.

Санитарная характеристика почв населенных мест основывается на лабораторных санитарно-химических, санитарно-бактериологических, санитарно-гельминтологических, санитарно-энтомологических показателях.

2. Нормативные ссылки

1. Закон Российской Федерации "Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан" .

2. Закон Российской Федерации "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" .

3. "Положение о государственной санитарно-эпидемиологической службе Российской Федерации" , утвержденное постановлением Правительства Российской Федерации от 30 июня 1998 г. N 680 .

4. "Положение о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании" , утвержденное постановлением Правительства Российской Федерации от 5 июня 1994 г. N 625 с изменениями и дополнениями от 30 июня 1998 г. N 680 .

5. Порядок разработки, экспертизы, утверждения, издания и распространения нормативных и методических документов системы санитарно-эпидемиологического нормирования. Р 1.1.001-1.1.005-96.

3. Термины и определения

Санитарное состояние почвы - совокупность физико-химических и биологических свойств почвы, определяющих качество и степень ее безопасности в эпидемическом и гигиеническом отношениях.

Химическое загрязнение почвы - изменение химического состава почвы, возникшее под прямым или косвенным воздействием фактора землепользования (промышленного, сельскохозяйственного, коммунального), вызывающее снижение ее качества и возможную опасность для здоровья населения.

Биологическое загрязнение почв - составная часть органического загрязнения, обусловленного диссеминацией возбудителей инфекционных и инвазионных болезней, а также вредными насекомыми и клещами, переносчиками возбудителей болезней человека, животных и растений.

Показатели санитарного состояния почв - комплекс санитарно-химических, микробиологических, гельминтологических, энтомологических характеристик почвы.

Буферная способность почвы - способность почвы поддерживать химическое состояние на неизменном уровне при воздействии на почву потока химического вещества.

Приоритетный компонент загрязнения почвы - вещество или биологический агент, подлежащий контролю в первую очередь.

Фоновое содержание (загрязнение) - содержание химических веществ в почвах территорий, не подвергающихся техногенному воздействию или испытывающих его в минимальной степени.

Предельно допустимая концентрация (ПДК) химического вещества в почве представляет собой комплексный показатель безвредного для человека содержания химических веществ в почве, т.к. используемые при ее обосновании критерии отражают возможные пути воздействия загрязнителя на контактирующие среды, биологическую активность почвы и процессы ее самоочищения. Обоснование ПДК химических веществ в почве базируется на 4 основных показателях вредности , устанавливаемых экспериментально: транслокационном , характеризующим переход вещества из почвы в растение, миграционный водный характеризует способность перехода вещества из почвы в грунтовые воды и водоисточники, миграционный воздушный показатель вредности характеризует переход вещества из почвы в атмосферный воздух и общесанитарный показатель вредности характеризует влияние загрязняющего вещества на самоочищающую способность почвы и ее биологическую активность. При этом каждый из путей воздействия оценивается количественно с обоснованием допустимого уровня содержания вещества по каждому показателю вредности. Наименьший из обоснованных уровней содержания является лимитирующим и принимается за ПДК .

4. Обозначения и сокращения

ПДК - предельно допустимая концентрация загрязнителя.

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация вещества.

5. Общие положения

5.1. Программа обследования почвы определяется целями и задачами исследования с учетом санитарно-эпидемического состояния района, уровня и характера техногенной нагрузки, условий землепользования.

5.2. При выборе объектов в первую очередь обследуют почвы территорий повышенного риска воздействия на здоровье населения (детские дошкольные, школьные и лечебные учреждения, селитебные территории, зоны санитарной охраны водоемов, питьевого водоснабжения, земли, занятые под сельхозкультуры, рекреационные зоны и т.д.).

5.3. Отбор, транспортирование, хранение, подготовка к анализу и анализ проб осуществляются в соответствии с утвержденными нормативными документами (позиции 3, 5, 9, 10, 11, 16, 17, 26, библиографические данные). Принципиальные положения по отбору проб почвы представлены в таблице 1.

Таблица 1

Методологические принципы отбора проб почвы для оценки санитарного состояния почв

Характер анализа

Частота отбора проб

Размещение пробных площадок

Необходимое количество пробных площадок

Размер пробных пло-
щадок

Количество объединенных проб с одной площадки

Глубина отбора проб, см

Масса объеди-
ненной пробы

санитарно- химический

не менее 1 раз/год

на разных расстояниях от источника загрязнения

не менее одной в каждом месте контроля

одна из не менее чем 5 точек по 200 г каждая

послойно
0-5
5-20

в т.ч. на
тяжелые металлы

не менее
1 раз в 3 года

бактериоло-
гический

не менее
1 раз/год

в местах возможного нахождения людей, животных, загрязнения органическими отходами

на площади 100 модна площадка

10 из 3-х точечных по 200-250 г каждая

послойно
0-5
5-20

гельминто-
логический

2-3 раза/год

то же, что и для бактериологии

на площади 100 модна площадка

4-10 каждая из 10 точечных по 20 г каждая

послойно
0-5
5-10 м

энтомологи-
ческий

не менее
2 раз/год

мусоро-
сборники разных типов, свалки, иловые площадки

вокруг одного объекта 10 площадок

1 из 10 площадок

Оценка биоло-
гической активности почв
(динамика самоочи-
щения)

в течение 3 месяцев (вегета-
ционный период)
1-й мес - еженедельно, затем
1 раз/месяц

не менее 1 экспериментальной и
1 контрольной площадки

1 объеди-
ненная из не менее, чем 5 точечных по 200 г

Контроль за загрязнением почв населенных пунктов проводится с учетом функциональных зон города. Места отбора проб предварительно отмечаются на картосхеме, отражающей структуру городского ландшафта. Пробная площадка должна располагаться на типичном для изучаемой территории месте. При неоднородности рельефа площадки выбирают по элементам рельефа. На территорию, подлежащую контролю, составляют описание с указанием адреса, точки отбора, общего рельефа микрорайона, расположения мест отбора и источников загрязнения, растительного покрова, характера землепользования, уровня грунтовых вод, типа почвы и других данных, необходимых для правильной оценки и трактовки результатов анализов образцов.

5.3.1. При контроле за загрязнением почв промышленными источниками площадки для отбора проб располагают на площади трехкратной величины санитарно-защитной зоны вдоль векторов розы ветров на расстоянии 100, 200, 300, 500, 1000, 2000, 5000 м и более от источника загрязнения (ГОСТ 17.4.4.02-84).

5.3.2. Для контроля санитарного состояния почв детских дошкольных, школьных и лечебно-профилактических учреждений, игровых площадок и зон отдыха отбор проб проводят не менее 2 раз в год - весной и осенью. Размер пробной площадки должен быть не более 5х5 м. При контроле санитарного состояния почв территорий детских учреждений и игровых площадок отбор проб проводится отдельно из песочниц и общей территории с глубины 0-10 см.

5.3.3. С каждой песочницы отбирается одна объединенная проба, составленная из 5 точечных. При необходимости возможен отбор одной объединенной пробы из всех песочниц каждой возрастной группы, составленной из 8-10 точечных проб.

Пробы почвы отбирают либо с игровых территорий каждой группы (одна объединенная из не менее пяти точечных), либо одна объединенная проба с общей территории из 10 точечных, при этом следует учитывать наиболее вероятные места загрязнения почв.

5.3.4. При контроле почв в районе точечных источников загрязнения (выгреба, мусоросборники и т.п.) пробные площадки размером не более 5х5 м закладываются на разном расстоянии от источника и в относительно чистом месте (контроль).

5.3.5. При изучении загрязнения почв транспортными магистралями пробные площадки закладываются на придорожных полосах с учетом рельефа местности, растительного покрова, метео- и гидрологических условий. Пробы почвы отбирают с узких полос длиной 200-500 м на расстоянии 0-10, 10-50, 50-100 м от полотна дороги. Одна смешанная проба составляется из 20-25 точечных, отобранных с глубины 0-10 см.

5.3.6. При оценке почв сельскохозяйственных территорий пробы почвы отбирают 2 раза в год (весна, осень) с глубины 0-25 см. На каждые 0-15 га закладывается не менее одной площадки размером 100-200 м в зависимости от рельефа местности и условий землепользования (26).

5.3.7. Геохимическое картирование территории крупных городов с многочисленными источниками загрязнения проводится по сети апробирования (12, 15). Для выявления очагов загрязнения геохимиками рекомендуемая плотность отбора 1-5 проб/км с расстоянием между точками отбора 400-1000 м. Для дальнейшего выделения территории с максимальной степенью загрязнения сеть апробирования сгущается до 25-30 проб/км и расстоянием между точками отбора около 200 м. Пробы рекомендуется отбирать с глубины 0-5 см. Размер сети апробирования может меняться в зависимости от масштаба картирования, характера использования территории, требований к уровню их загрязнения (приложение 1), а также пространственной вариабельностью содержания загрязнения на отдельных участках обследуемых территорий.

Картирование осуществляется специализированными организациями.

5.3.8. Точечные пробы отбирают в соответствии с ГОСТом , с соблюдением стерильности для санитарно-микробиологического и гельминтологического анализов и в доверху заполненные контейнеры с притертыми крышками при определении загрязнения летучими веществами, на пробной площадке методом конвертов. Объединенную пробу составляют из равных по объему точечных (не менее 5), отобранных на одной площадке. Объединенные пробы должны быть упакованы в чистые полиэтиленовые пакеты, закрыты, маркированы, зарегистрированы в журнале отбора проб и пронумерованы. На каждую пробу составляется сопроводительный талон, вместе с которым проба вкладывается во второй внешний пакет, что обеспечивает целостность и безопасность их транспортирования. Время от отбора проб до начала их исследований не должно превышать 1 суток.

Подготовка проб к анализу проводится в соответствии с видом анализа . В лаборатории проба освобождается от посторонних примесей, доводится до воздушно-сухого состояния, тщательно перемешивается и делится на части для проведения анализа. Отдельно оставляется контрольная часть от каждой анализируемой пробы (около 200 г) и хранится в холодильнике 2 недели на случай арбитража.

5.4. Перечень показателей химического и биологического загрязнения почв определяется исходя из:

- целей и задач исследования;

- характера землепользования (приложение 2);

- специфики источников загрязнения, определяющих характер (состав и уровень) загрязнения изучаемой территории (приложения 3, 4);

- приоритетности компонентов загрязнения в соответствии со списком ПДК и ОДК химических веществ в почве и их класса опасности по ГОСТу 17.4.1.02-83 . "Охрана природы. Почва. Классификация химических веществ для контроля загрязнения", (приложение 5).

5.5. Определение концентраций химических веществ в почве проводится методами, использованными при обосновании ПДК (ОДК) или методами, метрологически аттестованными (15, 18, , 22, ).

6. Оценка степени химического загрязнения почв

6.1. Основным критерием гигиенической оценки загрязнения почв химическими веществами является предельно допустимая концентрация (ПДК), или ориентировочно допустимая концентрация (ОДК) химических веществ в почве.

6.2. Оценка степени опасности загрязнения почвы химическими веществами проводится по каждому веществу с учетом следующих общих закономерностей:

- Опасность загрязнения тем выше, чем больше фактическое содержание компонентов загрязнения почвы превышает ПДК, что может быть выражено коэффициентом , т.е. опасность загрязнения тем выше, чем больше превышает единицу.

- Опасность загрязнения тем выше, чем выше класс опасности контролируемого вещества, его персистентность, растворимость в воде и подвижность в почве и глубина загрязненного слоя.

- Опасность загрязнения тем больше, чем меньше буферная способность почвы, которая зависит от механического состава, содержания органического вещества, кислотности почвы. Чем ниже содержание гумуса, рН почвы и легче механический состав, тем опаснее ее загрязнение химическими веществами.

6.3. При загрязнении почвы одним веществом неорганической природы оценка степени загрязнения проводится в соответствии с таблицей 2 (27, 28) с учетом класса опасности компонента загрязнения, его ПДК и максимального значения допустимого уровня содержания элемента () по одному из четырех показателей вредности (приложение 7).

Таблица 2

Критерии оценки степени загрязнения почв неорганическими веществами

Класс опасности вещества

2 класс

3 класс

Очень сильная

Очень сильная

От ПДК до

Очень сильная

От 2 фоновых значений до ПДК

6.5. При загрязнении почв одним веществом органического происхождения его опасность определяется исходя из его ПДК (13) и класса опасности (таблица 3).

Таблица 3

Критерии оценки степени загрязнения почвы органическими веществами

Класс опасности вещества

1 класс

>5 ПДК

Очень сильная

Очень сильная

Сильная

От 2 до 5 ПДК

Очень сильная

От 1 до 2 ПДК

6.6. При полиэлементном загрязнении оценка степени опасности загрязнения почвы допускается по наиболее токсичному элементу с максимальным содержанием в почве.

6.7. Оценка уровня химического загрязнения почв как индикатора неблагоприятного воздействия на здоровье населения проводится по показателям, разработанным при сопряженных геохимических и геогигиенических исследованиях окружающей среды городов с действующими источниками загрязнения. Такими показателями являются: коэффициент концентрации химического вещества (). определяется отношением фактического содержания определяемого вещества в почве () в мг/кг почвы к региональному фоновому ():

И суммарный показатель загрязнения (). Суммарный показатель загрязнения равен сумме коэффициентов концентраций химических элементов-загрязнителей и выражен формулой:

Где - число определяемых суммируемых веществ;

Коэффициент концентрации -гo компонента загрязнения.

Анализ распределения геохимических показателей, полученных в результате апробирования почв по регулярной сети, дает пространственную структуру загрязнения селитебных территорий и воздушного бассейна, и позволяет выделить зоны риска для здоровья населения (7, 12).

6.8. Оценка степени опасности загрязнения почв комплексом металлов по показателю , отражающему дифференциацию загрязнения воздушного бассейна городов как металлами, так и другими наиболее распространенными ингредиентами (пыль, окись углерода, окислы азота, сернистый ангидрид), проводится по оценочной шкале, приведенной в таблице 4.

Таблица 4

Ориентировочная оценочная шкала опасности загрязнения почв
по суммарному показателю загрязнения (
) (7, 29)

Величина

Изменения показателей здоровья населения в очагах загрязнения

Допустимая

Наиболее низкий уровень заболеваемости детей и минимальная частота встречаемости функциональных отклонений

Умеренно опасная

Увеличение общей заболеваемости

Увеличение общей заболеваемости, числа часто болеющих детей, детей с хроническими заболеваниями, нарушениями функционального состояния сердечно-сосудистой системы

Чрезвычайно опасная

Увеличение заболеваемости детского населения, нарушение репродуктивной функции женщин (увеличение токсикозов беременности, числа преждевременных родов, мертворождаемости, гипотрофий новорожденных)


Определение химических веществ при оценке уровня загрязнения почв населенных пунктов по проводят методом эмиссионного анализа в соответствии с методическими указаниями (7, 12).

6.9. Оценка неблагоприятных последствий загрязнения почв при их непосредственном воздействии на организм человека важна для случаев геофагии у детей при играх на загрязненных почвах. Такую оценку проводят по наиболее распространенному в населенных пунктах загрязняющему веществу - свинцу, повышенное содержание которого в почвах города, как правило, сопровождается увеличением содержания и других элементов. При систематическом нахождении свинца в почве игровых площадок в пределах 300 мг/кг можно ожидать изменение психоневрологического статуса у детей (15). Безопасным считается загрязнение свинцом на уровне ПДК в почве.

6.10. Оценка почв сельскохозяйственного использования проводится в соответствии с принципиальной схемой, приведенной в приложении 6.

6.11. Для принятия административных решений о характере использования земель, в разной степени загрязненных химическими веществами, рекомендуется руководствоваться РД "Порядок определения ущерба от загрязнения земель химическими веществами" (24) с учетом характера землепользования.

7. Оценка санитарного состояния почвы по санитарно-химическим показателям

7.1. Санитарно-химическими показателями санитарного состояния почв являются:

Санитарное число - косвенно характеризует процесс гумификации почвы и позволяет оценить самоочищающую способность почвы от органических загрязнений.

Санитарное число - это отношение количества "почвенного белкового (гумусного) азота "" в миллиграммах на 100 г абсолютно сухой почвы к количеству "органического азота "" в миллиграммах на 100 г абсолютно сухой почвы. Таким образом, частное от деления: . Оценка санитарного состояния почвы по этому показателю проводится в соответствии с таблицей 5.

Таблица 5

Оценка чистоты почвы по "Санитарному числу" (по Н.И.Хлебникову) (8)

Характеристика почв

Санитарное число

Практически чистая

0,98 и больше

Слабо загрязненная

от 0,85 до 0,98

Загрязненная

от 0,70 до 0,85

Сильно загрязненная

меньше 0,70

7.2. Химическими показателями процессов разложения азотсодержащего органического вещества в почве являются аммиачный и нитратный азот. Аммонийный азот, нитратный азот и хлориды характеризуют уровень загрязнения почвы органическим веществом. Оценку почв по этим показателям целесообразно осуществлять в динамике или путем сравнения с незагрязненной почвой (контроль).

8. Оценка степени биологического загрязнения почв

8.1. Санитарно-бактериологические показатели

8.1.1. В загрязненной почве на фоне уменьшения истинных представителей почвенных микробоценозов (антагонистов патогенной кишечной микрофлоры) и снижения ее биологической активности отмечается увеличение положительных находок патогенных энтеробактерий и геогельминтов, которые более устойчивы к химическому загрязнению почвы, чем представители естественных почвенных микробоценозов. Это является одной из причин необходимости учета эпидемиологической безопасности почвы населенных пунктов. С увеличением химической нагрузки может возрастать эпидемическая опасность почвы.

8.1.2. Оценка санитарного состояния почвы проводится по результатам анализов почв на объектах повышенного риска (детские сады, игровые площадки, зоны санитарной охраны и т.п.) и в санитарно-защитных зонах по санитарно-бактериологическим показателям:

1) Косвенные, характеризуют интенсивность биологической нагрузки на почву. Это - санитарно-показательные организмы группы кишечной палочки (БГКП (Колииндекс) и фекальные стрептококки (индекс энтерококков) ). В крупных городах с высокой плотностью населения биологическая нагрузка на почву очень велика, и как следствие, высоки индексы санитарно-показательных организмов, что наряду с санитарно-химическими показателями (динамика аммиака и нитратов, санитарное число), свидетельствует об этой высокой нагрузке.

2) Прямые санитарно-бактериологические показатели эпидемической опасности почвы - обнаружение возбудителей кишечных инфекций (возбудители кишечных инфекций, патогенные энтеробактерии, энтеровирусы).

8.1.3. Результаты анализов оцениваются в соответствии с таблицей 6.

Таблица 6

Схема оценки эпидемической опасности почв населенных пунктов

Показатели кл/г

Объекты

Кишеч-
ные палочки

Энтеро-
бакте-
рии

Пато- генные энтеро-
бакте- рии

Энтеро-
вирусы

Яйца гельминтов экз/кг, аскарид, власо- главов, токсокар, онкосфер, тениид

Цисты кишеч- ных пато- генных прос- тейших* экз/100 г

Личинки (Л)
и куколки (К) мух экз. в почве с площади 20х20 см

Зоны повышенного
риска:

Территории детских дошкольных и школьных учреждений, зон рекреации (парки и скверы и др.), огородов, выгульных площадок.

Загряз-
ненная

Л - до 10

К - отсутствие

Зоны санитарной охраны водоемов

Загряз-
ненная

К - отсутствие

Санитарно-
защитные зоны

Загряз-
ненная

К - отсутствие

* Примечание: Цисты кишечных простейших: лямблий, амеб, балантидий, криптоспоридий.

"-" - отсутствие в почве, "+" - наличие в почве.


8.1.4. При отсутствии возможности прямого определения в почвах энтеробактерий и энтеровирусов оценка безопасности может быть проведена ориентировочно по индикаторным микроорганизмам.

8.1.5. Почву оценивают как "чистую" без ограничений по санитарно-бактериологическим показателям при отсутствии патогенных бактерий и индексе санитарно-показательных микроорганизмов до 10 клеток на грамм почвы.

О возможности загрязнения почвы сальмонеллами свидетельствует индекс санитарно-показательных организмов (БГКП и энтерококков) 10 и более клеток/г почвы.

Концентрация колифага в почве на уровне 10 БОЕ на г и более свидетельствует об инфицировании почвы энтеровирусами.

8.1.6. Санитарно-бактериологические исследования проводятся в соответствии с нормативно-методической литературой, приведенной выше в разделе 2 (9, 10, 21).

8.2.3. Прямую угрозу здоровью населения представляет загрязнение почвы жизнеспособными оплодотворенными и инвазионными яйцами аскарид, власоглавов, токсокар, анкилостомид, личинками стронгилоидов, а также онкосферами тениид, цистами лямблий, изоспор, балантидий, амеб, ооцистами криптоспоридий; опосредованную - жизнеспособными яйцами описторхисов, дифилоботриид.

8.3. Санитарно-энтомологические показатели

8.3.1. Санитарно-энтомологическими показателями являются личинки и куколки синантропных мух.

Синантропные мухи (комнатные, домовые, мясные и др.) имеют важное эпидемиологическое значение как механические переносчики возбудителей ряда инфекционных и инвазионных болезней человека (цисты кишечных патогенных простейших, яйца гельминтов и др.).

8.3.2. На территории населенных мест в общественных и частных домовладениях, пищевых и торговых предприятиях, пунктах частного и общественного питания, в зоопарке, местах содержания служебных и спортивных животных (лошади, собаки), мясо- и молочные комбинаты и т.п. наиболее вероятными местами выплода мух являются скопления разлагающихся органических веществ (мусоросборники разных типов, уборные, свалки, иловые площадки и др.) и почвы вокруг них на расстоянии до 1 м.

8.3.3. Критерием оценки санитарно-энтомологического состояния почвы является отсутствие или наличие преимагинальных (личинки и куколки) форм синантропных мух в ней на площадке размером 20х20 см.

8.3.4. Оценка санитарного состояния почв по наличию в ней личинок и куколок мух проводится в соответствии с таблицей 6.

Наличие личинок и куколок в почве населенных мест является показателем неудовлетворительного санитарного состояния почвы и указывает на плохую очистку территории, неправильный в санитарно-гигиеническом отношении сбор и хранение бытовых отходов и их несвоевременное удаление.

8.3.5. Санитарно-энтомологические исследования проводятся в соответствии с методическими указаниями ().

9. Показатели биологической активности почвы

9.1. Исследования по биологической активности почвы проводятся при необходимости углубленной оценки ее санитарного состояния и способности к самоочищению.

9.2. Основными интегральными показателями биологической активности почвы являются: общая микробная численность (ОМЧ), численность основных групп почвенных микроорганизмов (почвенных сапрофитных бактерий, актиномицетов, почвенных микромицетов), показатели интенсивности трансформации соединений углерода и азота в почве ("дыхание" почвы, "санитарное число", динамика азота аммиака и нитратов в почве, азотфиксация, аммонификация, нитрификация и денитрификация), динамика кислотности и окислительно-восстановительного потенциала в почве, активность ферментативных систем и другие показатели.

9.3. Перечень показателей определяется целями исследования, природой и интенсивностью загрязнения, характером землепользования.

На первом этапе исследований целесообразно использование наиболее простых и быстро определяемых информативных интегральных показателей: "дыхание" почвы, общая микробная численность, окислительно-восстановительный потенциал и кислотность почв, динамика азота аммиака и нитратов.

Дальнейшее углубленное исследование проводится в соответствии с полученными результатами и общими задачами исследования.

9.4. Методики измерений и оценки биологической активности почвы приведены в "Методических указаниях по гигиеническому обоснованию ПДК химических веществ в почве" от 05.08.82 N 2609-82. Так, почву можно считать "незагрязненной" по показателям биологической активности при изменениях в микробиологических показателях не более 50% и биохимических - не более 25% по сравнению с такими же для контрольных, принятых в качестве чистых незагрязненных почв.
В этом случае вы можете повторить покупку документа с помощью кнопки справа.

Произошла ошибка

Платеж не был завершен из-за технической ошибки, денежные средства с вашего счета
списаны не были. Попробуйте подождать несколько минут и повторить платеж еще раз.

Для суждения о санитарном состоянии почвы используются показатели, которые позволяют определить ее безопасность в эпидемическом, химическом и радиационном отношении . Одни из них, прямые показатели, непосредственно свидетельствуют о загрязнении почвы. Другие, косвенные, позволяют сделать выводы о наличии загрязнения, его давности и продолжительности только при сравнении показателей исследуемой почвы с показателями чистой контрольной почвы. К прямым показателям эпидемической безопасности почвы относятся санитарно-микробиологические, санитарно-гельминтологические и санитарно-энтомологические показатели (табл.5.3). В число санитарно-микробиологических показателей входят коли-титр и титр анаэробов , представляющие собой наименьшее количество почвы, из которого можно вырастить кишечную палочку (коли-титр) или Cl. Perfringens (титр анаэробов). При свежем фекальном загрязнении величина коли-титра и титра анаэробов резко уменьшается, причем преобладают неспороносные формы. При загрязнении, имеющем определенную давность, когда кишечная палочка и патогенные неспорообразующие бактерии отмирают, наблюдается увеличение коли-титра при сравнительно более низких показателях титра анаэробов. Это объясняется тем, что спорообразующие микроорганизмы сохраняют свою жизнеспособность на протяжении длительного времени.

Обнаружение большого количества жизнеспособных недеформированных яиц геогельминтов свидетельствует о недавнем загрязнении почвы. Нахождение же лишь небольшого количества деформированных яиц аскариды позволяет сделать заключение о значительной давности загрязнения, так как яйца аскариды, в отличие от яиц многих других геогельминтов, сохраняют свою жизнеспособность в течение более длительного времени – до 10 лет.

Наличие мух и их личинок в почве является показателем загрязнения почвы различными отходами и неудовлетворительной очистки

Санитарно-химическим показателем, позволяющим непосредственно судить о степени загрязнения почвы, является санитарное число Хлебникова . Санитарным числом называется отношение почвенного белкового азота (азота гумуса) к общему количеству органического азота (азот гумуса+азот органических загрязнителей) в почве. В чистой почве санитарное число Хлебникова достигает 0,98-1,0, при значительном загрязнении резко снижается (табл.5.3).

Другие, применявшиеся ранее (содержание общего органического азота, углерода, хлоридов, аммонийных солей, нитритов, нитратов), санитарно-химические показатели загрязнения почвы отбросами оценивают только в сравнении с показателями контрольного, незагрязненного участка, что представляет собой определенные трудности. Более высокое содержание


Таблица 5.3

Показатели санитарного состояния почвы

Степень опасности Степень загрязнения Показатели эпидемической безопасности Показатель загрязнения экзогенными химическими веществами -кратность превышения ПДК Показатель загрязнения радиоактив-ными вещест-вами Показатель самоочище-ния почвы – титр термо-филов
Санитарно-микробиоло-гические Санитарно-гельминто-логические Санитарно-энтомоло-гические Санитарно-химические
Коли-титр Титр-анаэ-робов Число яиц гельминтов в 1 кг почвы Число личинок и куколок мух на участке 25 м 2 Санитарное число Хлебникова
Безопасная Чистая >1,0 >0,1 0,98-1,0 <1 Естественный уровень 0,01-0,001
Относительно безопасная Слабо загрязненная 1,0-0,01 0,1-0,001 до 10 1-10 0,85-0,98 1-10 Превышение естественного уровня в 1,5 раза 0,01-0,00002
Опасная Загрязненная 0,01-0,001 0,001-0,0001 11-100 10-100 0,7-0,85 10-100 Превышение естественного уровня в 2 раза 0,00002-0,00001
Чрезвычайно опасная Сильно загрязненная <0,001 <0,0001 >100 >100 <0,7 >100 Превышение естественного уровня в 3 раза <0,00001

в почве исследуемого участка органического азота, углерода и хлоридов указывает на свежее его загрязнение. Повышенное количество аммиака, нитритов и нитратов свидетельствует о процессах самоочищения.

При выборе объектов для данного исследования необходимо учитывать их роль как возможных факторов передачи возбудите­лей инвазии (возможность обсеменения инвазионным материалом, а также контакта с человеком).

Бесполезно изучать обсемененность яйцами гельминтов участков почвы, плотно утрамбованных и по­стоянно облучаемых солнцем (например, на дорожках яйца гельмин­тов на их поверхности погибают, а попадания их с поверхности утрамбованной почвы в более глубокие слои не происходит).

Отбор проб почвы. При изучении степени загрязнения почвы яйцами гельминтов пробы ее отбирают в соответствии с ГОСТом17-4.4-02-84 «Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подго­товки проб для химического, бактериологического, гельминтоло­гического и протозоологического исследования». Их берут с поверх­ности (1-3 см) - во дворах; с поверхности и с глубины 10-20 см - на огородах, в садах, на полях орошения.

С поверхности (1-3 см) пробы почвы берут ложкой, совочком или большим шпателем, а с глубины 10-20 см - лопатой или буром Некрасова. Пробы помещают в банки с крышками или пакеты из клеенки, целлофана. Каждая проба должна иметь этикетку с указа­нием места забора, даты, глубины, характера исследуемого участ­ка (в тени или на солнце, состав почвы, наличие растительности и т.п.).

Для выяснения обсеменения яйцами гельминтов исследуемой тер­ритории на участках вблизи выгребов, мусорных ящиков и подоб­ных мест выделяют площадку в 25 м2. Другую площадку такого же размера берут вдали от указанных объектов. С каждой из этих пло­щадок по диагонали отбирают 5-10 навесок по 10-20 г. После тщательного перемешивания этих навесок составляют среднюю пробу (масса каждой не менее 100-200 г).

В лаборатории пробы помещают (в пакетах) в холодильник или каждую из них пересыпают в кристаллизатор, заливают 3 % раство­ром формалина на физиологическом растворе (жидкость Барбагалло) или 3 % раствором соляной кислоты, а затем ставят в холодиль­ник. В холодильнике почву можно хранить не более 1 мес, время от времени аэрируя и увлажняя ее.

Методика исследования. Для исследования почвы на яйца гель­минтов предложены следующие методы.

Метод З.Г.Васильковой и В.А.Гефтер (1948) заключается в том, что 5-Ю г почвы тщательно смешивают с 5 % раствором едкого натра (или калия) в центрифужных пробирках объемом 50 см3, смесь центрифугируют в течение 1-2 мин, после чего избыток едкого натрия (или калия) сливают, осадок тщательно смешивают с насы­щенным раствором нитрата натрия (плотность 1,39) и центрифуги­руют в течение 2 мин не менее 5 раз. После каждого центрифугиро­вания поверхностную пленку переносят петлей в стаканчик с водой; смесь вновь тщательно перемешивают и центрифугируют. Снятую поверхностную пленку фильтруют в аппарате Гольдмана с исполь­зованием планктонных фильтров, которые затем микроскопируют. По данным авторов, эффективность метода достигает 44,6 %. Было предложено вместо снятия поверхностной пленки из центрифужных пробирок сливать часть насыщенного раствора соли в стаканчик с водой, а в пробирки с осадком добавлять столько же чистого ра­створа соли. Такую процедуру следует повторять не менее 3-5 раз. Последний раз сливается весь раствор соли, который фильтруют в аппарате Гольдмана, используя фильтры № 6, затем проводят микроскопию последних. Благодаря такому усовершенствованию автору удалось повысить эффективность выявления яиц гельминтов из почвы до 60-69,2 %.

В.А.Лугина (1968) рекомендовал вначале обрабатывать почву по методу З.Г.Васильковой и В.А.Гефтер, а затем, удалив щелочь, к осадку добавлять насыщенный раствор нитрата аммония. После пе­ремешивания и центрифугирования смеси сливают насыщенный раствор в стаканчик высотой 3 см, последний накрывают счетной пластинкой и весь раствор микроскопируют. Это исключает исполь­зование аппарата Гольдмана, насоса Камовского, фильтры. Недо­статки: трудность просмотра раствора соли, многократные перели­вы последнего снижают эффективность выявления яиц гельминтов на 20-30 %.

Н.А.Романенко (1968) и Г.Ш.Гуджабидзе (1969) предложили помещать 25 г почвы в центрифужные пробирки объемом 250 мл (в случае отсутствия пробирок такого объема можно пользоваться пробирками объемом 80-100 мл, но помещать в них следует 15 г почвы) и заливать ее 3 % раствором натриевой или калиевой щело­чи (в соотношении 1:1). После этого содержимое пробирок тщатель­но размешивают при помощи электромешалки или стеклянных па­лочек, отстаивают в течение 20-30 мин, а затем центрифугируют 5 мин при 800 об/мин. Надосадочную жидкость сливают, а почву промывают водой (1-5 раз в зависимости от типа почвы: для пес­чаных и супесчаных - достаточно одной промывки, для глинистых, суглинистых, черноземных - от 2 до 5) до получения прозрачной надосадочной жидкости. После промывки к почве добавляют 150 мл (45 мл в пробирки объемом 100 мл) насыщенного (плотность 1,38- 1,4) раствора нитрата натрия, тщательно размешивают и центрифу­гируют. Пробирки устанавливают в штатив, доливают тем же ра­створом соли до уровня на 2-3 мм ниже краев пробирок и накры­вают предметными стеклами. При этом очень важно исключить какую-либо потерю поверхностной пленки. Для этого между краем пробирки и предметным стеклом следует оставлять пространство шириной не более 10 мм, куда с помощью пипетки вносят насыщен­ный раствор соли до его соприкосновения с нижней поверхностью стекла. После этого предметные стекла осторожно передвигают до полного покрытия центрифужных пробирок. Через 20-25 мин от­стоя стекла снимают, переворачивая нижней поверхностью вверх, а на их место ставят другие, при необходимости и третьи. На снятые стекла наносят несколько капель 50 % раствора глицерина. Капли накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Для обнаруже­ния яиц гельминтов предметные стекла просматривают при увели­чении в 80 раз (окуляр 10х, объектив 8X0,2), а для определения сте­пени их развития или деформации - в 400 раз (окуляр 10х, объек­тив 40X0,65). Эффективность метода 59,6-83,1 %, в среднем 73 %; на нее оказывают влияние тип и механический состав почвы, содер­жание перегноя, илистых фракций, емкость поглощения. Путем эк­спериментальных исследований рассчитаны поправочные коэффи­циенты (табл. 11) для установления истинного загрязнения некото­рых типов почв яйцами гельминтов. Применение поправочных ко­эффициентов позволяет определять истинное обсеменение почвы яйцами гельминтов. Для других типов почв и яиц гельминтов необ­ходимо провести дополнительные экспериментальные исследования.

Таблица 11. Поправочные коэффициенты для расчета истинной загрязненности некоторых почв яйцами гельминтов bgcolor=white>1,71
Почва Яйца
аскарид власоглавов
Дерново-подзолистая (супесь) 1,23 1,43
Дерново-подзолистая (суглинок) 1,45 1,5
Торфяно-глеевые 1,84 2,4
Чернозем обыкновенный 1,6 1,85
» типичный 1,7 2,3
» выщелоченный 1,43 2,1
» каштановый (супесь) 1,28 1,95
» каштановый (суглинок) 1,64 2,15
Аллювиально-лугово-лесная 1,37 1,65
Сероземы 1,39 1,6
Черная лесная 1,49
Горная лесная бурая 1,54 1,72
Желтоземы 1,79 1,94

На обработку проб почвы рекомендуемым методом затрачива­ется 4,6-10 ч (метод З.Г.Васильковой и В.А.Гефтер в модификации А.А.Намитокова требует 9-51,5 ч, т.е. в 2-5 раз больше), а эконо­мические расходы при этом снижаются в 2 раза. При этом исклю­чаются применение такой дефицитной и дорогостоящей аппарату­ры, как воронка Гольдмана, насосы Шинца и Камовского, фильт­рование, фильтры № 6. Некоторые авторы предложили проводить исследование поверхностной пленки непосредственно в центрифуж­ной пробирке под бинокулярным микроскопом МБС. Это позволя­ет сократить время исследования и повышает эффективность ана­лиза, так как исключает потери яиц гельминтов во время снятия по­верхностной пленки предметным стеклом.

Авторы рекомендуют подвергать почву трехкратной механической обработке электроме­шалкой с флотационным раствором, учитывая при этом, что добав­ление солевого раствора в пробирку после последней механической обработки нарушает поверхностную пленку. В связи с этим необ­ходима 10-минутная экспозиция исследуемой пробы перед ее микроскопированием, чтобы все яйца гельминтов снова оказались в поверхностной пленке. При этих условиях в пробах обнаруживает­ся свыше 70 % яиц гельминтов [Межазакис Ф.И., 1979].

Необходимо помнить, что в очагах описторхоза, клонорхоза дан­ная методика малопригодна, ибо яйца этих гельминтов, имеющие плотность больше таковой насыщенного раствора нитрата натрия, не будут всплывать в поверхностную пленку, а, наоборот, выпа­дут в осадок.

В таких случаях целесообразно применять флотационные раство­ры высокой плотности. Некоторые авторы предлагают для исследо­вания почвы и донных отложений на яйца гельминтов методику с использованием малогабаритной клинической центрифуги ОПН-3.

Пробы донных отложений поверхностных водоемов отбирают в соответствии с ГОСТом 17.1.5.01.-80 «Охрана природы. Гидросфе­ра. Общие требования к отбору донных отложений водных объек­тов для анализа на загрязненность». Для отбора проб применяют различные системы пробоотборников: дночерпатели, драги, стратиметры и трубки различных конструкций. Отбор проб донных отло­жений ручным или механизированным способом проводят с берега или различных плавсредств. Пробы помещают в стеклянные или другие емкости, этикетируют и доставляют в лабораторию, где их хранят в холодильнике.

В 20 клинических центрифужных пробирок объемом по 10 мл наливают 6 мл 2-3 % раствора едкого натрия (или калия) и вносят 2 = 2,5 г почвы или донных отложений (общая масса материала со­ставляет 40-50 г). Содержимое пробирок перемешивают стеклян­ной палочкой и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 3 мин. В дальнейшем режим центрифугирования остается постоянным. После центрифугирования надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 8 мл воды. Смесь перемешивают и центрифуги­руют. Надосадочную жидкость сливают, а к осадку добавляют 3 мл раствора натриевой или аммиачной селитры (молярное соотноше­ние 9,4:5, плотность 1,4). Содержимое пробирок вновь тщательно перемешивают. При этом яйца гельминтов из почвы переходят в насыщенный раствор. Пробирки центрифугируют и оставляют в покое на 5 мин, после чего надосадочную жидкость переливают в чистый ряд пробирок (одна в одну) и доливают в каждую из них чистой воды до отметки 10 мл. При этом плотность раствора по­нижается до 1,05. Пробирки встряхивают и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 мин. Этот прием позволяет сконцентриро­вать яйца гельминтов в осадке. Надосадочную жидкость сливают, а осадок из каждых 10 пробирок переносят в 2 пробирки. Таким об­разом, из 20 пробирок осадок концентрируется в 4. В каждую про­бирку к осадку доливают воду и сверху наслаивают 1 мл эфира. Про­бирки интенсивно встряхивают в течение 30-40 с, центрифугиру­ют при 1500 об/мин в течение 5 мин. Надосадочную жидкость сливают, осадок переносят пастеровской пипеткой на предметное стекло и накрывают покровными стеклами размером 20X20 мм. В случае если осадка мало, его просматривают весь, если его мно­го - к нему добавляют до 0,5 мл воды и просматривают из всего осадка только 0,1 или 0,2 мл, а полученный результат пересчитыва­ют на весь объем осадка, умножая в первом случае на 5, во втором на 2,5. Результаты просмотра осадка, взятого из каждой пробирки, суммируют.

Для повышения эффективности выявления яиц гельминтов и со­кращения затрат времени на микроскопирование при исследовании почвы нами предложена камера для количественного учета яиц гель­минтов во флотационной жидкости. Камера - усеченный стеклян­ный конус с углом наклона стенок 85°, приваренный широкой час­тью к дну чашки Петри. Диаметр верхней части 2,5 см, нижней 4 см, площадь соответственно 5,3 и 15,2 см2, высота 3,5 см, объем 25,6 см3.

Верхняя часть камеры покрывается счетной пластинкой из плек­сигласа размером 7X7X0,1 см. На одной поверхности пластинки на­несены параллельные линии - борозды, окрашенные в красный цвет; расстояние между ними 1,2 мм. Последнее равно диаметру поля зрения микроскопа МБИ-1 при кратности увеличения 10x10. Каме­ру заполняют поверхностным слоем флотационной жидкости до об­разования выпуклого мениска, после чего ее покрывают счетной пластинкой так, чтобы разлинованная поверхность была обращена к жидкости. Яйца гельминтов всплывают в течение 3-5 мин. Затем камеру помещают на предметный столик микроскопа и просматри­вают последовательно по интервалам между линиями. Для макси­мального выявления яиц гельминтов рекомендуется несколько раз собрать поверхностный слой флотационной жидкости. Камеру обез­зараживают кипячением в течение 10 мин, а счетную пластинку опускают на 15-20 ч в 2 % раствор карболовой кислоты.

Эффективность выявления яиц гельминтов с помощью предла­гаемой камеры изучена в сравнении с таковой при использовании способа В.А.Лугйны, применяемого при исследовании почвы и бы­товых сточных вод с одновременным учетом времени, затрачивае­мого на микроскопирование при каждом из сравниваемых способов.

Предлагаемой нами камерой выявляется больше на 15,9 % яиц гельминтов в почве и на 32 % в сточных водах и затрачивается в 4 раза меньше времени на микроскопирование. Большую определяемость яиц гельминтов и снижение затрат времени на микроскопи­рование предлагаемой камерой, по-видимому, можно объяснить уменьшением площади микроскопирования в конусе, более полным просмотром поверхностной пленки и исключением повторного мик­роскопирования полей зрения, а также возможностью просмотра всей толщи флотационной жидкости.

Приготовление насыщенных растворов. Для приготовления насы­щенных растворов можно применять как химически чистую соль, так и техническую селитру, используемую в ветеринарной практи­ке, сельском хозяйстве.

Раствор натрия н и трат a (NaN03). В кастрюле или ведер­ке смешивают натрия нитрат (или любую другую соль) с водой в соотношении 1:1 (1 кг соли на 1 л воды) и подогревают ее до обра­зования кристаллической пленки на поверхности растврра. Затем ра­створ охлаждают, измеряют денситометром его плотность (должна быть не ниже 1,38-1,4). При охлаждении насыщенного раствора на дно сосуда должны выпадать кристаллы соли.

Раствор свинца нитрата , Готовят раствор плотностью 1,5 (обладает высокой флотационной способностью). Берут 650 г вещества на 1 л воды. Соль растворяют в горячей воде в эмалированном ведре. Ее кладут в ведро с горячей водой порция­ми, подогревая содержимое ведра на электроплитке и постоянно пе­ремешивая до полного растворения. Фильтровать раствор необяза­тельно. Раствор свинца нитрата со временем дает осадок. В связи с этим его плотность уже через 24 ч после приготовления несколько падает. Поэтому раствор готовят в день исследования. Если же он приготовлен в большом количестве, то в последующие дни перед ис­следованием его подогревают, размешивая осадок. Свинца нит­рат - соль тяжелого металла, поэтому при работе соблюдают ос­торожность, избегая попадания вещества исследующему внутрь.

При помощи санитарно-гельминтологических исследований обнаруживают яйца и личинки гельминтов в окружающей среде, определяют видовой, количественный состав, их жизнеспособность.

Исследование почвы на яйца гельминтов . Пробы почвы массой 100- 300 г отбирают на глубине 10-60 см вблизи выгребов, мусорных ящиков, на детских площадках и т. д. Заливают их 0,85% водным раствором натрия хлорида или 3% жидкостью Барбагалло и хранят до исследования в бытовом холодильнике. Срок хранения проб - не более 1 мес. Исследуют почву по методу Романенко (1968, 1982): 25 г почвы помещают в центрифужные пробирки объемом 250 мл, приливают 3% раствор натриевого или калиевого основания в соотношении 1:1. Полученную смесь тщательно размешивают, отстаивают в течение 20- 30 мин, после чего центрифугируют 5 мин при 800 об/мин. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок промывают 1-5 раз до получения прозрачной надосадочной жидкости. Затем к осадку добавляют 150 мл насыщенного раствора азотнокислого натрия (относительная плотность - 1,38-1,40), тщательно размешивают и центрифугируют, после чего в каждую пробирку добавляют тот же раствор до уровня на 2-3 мм ниже их краев. Пробирки накрывают предметным стеклом так, чтобы оставался зазор шириной не более 10 мм, через который пипеткой добавляют раствор азотнокислого натрия до соприкосновения его с нижней поверхностью предметного стекла. Затем осторожно полностью закрывают предметным стеклом пробирку и после 20-25-минутного отстаивания стекло снимают и переворачивают его нижней поверхностью вверх. На место снятого стекла ставится второе, а при необходимости - и третье. На снятые стекла наносится капля 50% раствора глицерина, накрывается покровным стеклом и микроскопируется под световым микроскопом. Можно исследовать поверхностную пленку непосредственно в центрифужной пробирке под бинокулярным микроскопом МБС (Н. Л. Чекина, 1977).

На личинки гельминтов почву исследуют по методу Бермана .
Исследование воды на яйца гельминтов . Пробу воды отбирают и* водоемов в количестве от 0,5 до 10 л, что зависит от степени ее загрязнения, а из колодцев - от 20 до 25 л. Рекомендуется отбирать воду по« 0,5 - 1 л через каждые 3-5 мни. Содержащиеся в воде яйца концентрируют путем осаждения или фильтрации при помощи мембранных, бумажных или тканевых фильтров. Анализ воды осуществляют по методу Васильковой.

Исследование сточных вод на яйца гельминтов . Пробы сточной воды в условиях малых очистных сооружений отбирают на следующих этапах ее очистки: до поступления на очистные сооружения («сырая» вода), в отстойной части установки, контактном резервуаре, при впадении в биоируд или открытый водоем. На централизованных очистных: сооружениях воду отбирают до поступления на очистные сооружения, после механической очистки, после вторичных отстойников, биологических прудов, полей фильтрации, земледельческих полей орошения. «Сырую» воду исследуют в количестве от 2 до 5 л, а в процессе искусственной биологической очистки и после завершения ее - от 10 до 15 л. Пробы отбирают через каждый час в течение суток (среднесуточная) или с 7 до 20 ч (среднедневная). Исследуют сточную воду по методу Романенко. Сточную воду наливают в стеклянный цилиндр емкостью 1-2 л, добавляют один из коагулянтов (сернокислые алюминий, железо или медь) в дозе 0,3-0,5 г/л и тщательно размешивают. Спустя 40-50 мин осветленную надосадочную жидкость удаляют сифоном, а осадок переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют в течение 3 мин при 1000 об/мин. Затем сливают жидкую часть, а к осадку приливают 2-4 мл 1-3% раствора соляной кислоты для растворения хлопьев коагулянта. Полученную смесь центрифугируют, удаляют жидкую часть, а осадок исследуют в дальнейшем по методике Романенко, применяемой для анализа почвы.
И. К. Падченко с соавторами (1982) разработал следующие методики исследования почвы, воды и сточных вод на яйца гельминтов.

Исследование почвы на яйца гельминтов. Отобранную пробу почвы (не менее 300 г) вносят в большую фаянсовую ступку, постепенно добавляют к ней 3% раствор натриевого или калиевого основания и тщательно растирают пестиком до образования гомогенной массы. Полученную смесь выливают в стеклянный цилиндр емкостью 10 л, предварительно наполненный на 3/4 объема водопроводной водой, и отстаивают в течение 5 мин. Всплывшие на поверхности смеси плотные примеси удаляют петлей с сеткой. После 5-минутного отстаивания надосадочную жидкость переливают сифоном в другой большой цилиндр, а образовавшийся осадок переносят в цилиндр емкостью 1 л и повторно отмывают водопроводной водой (не менее 2-3 раз). Образующуюся при этом в малом цилиндре надосадочную жидкость каждый раз переливают сифоном после 5-минутного отстаивания в большой цилиндр, где она смешивается с жидкой частью смеси, полученной после первого 5-минутного отстаивания. К собранной в большом цилиндре жидкости добавляют один из коагулянтов (сернокислый алюминий, сернокислое железо и др.) из расчета 0,3 г на 1 л жидкости и отстаивают ее 1-1,5 ч до полного просветления. Образовавшуюся надосадочную жидкость удаляют сифоном, а к осадку добавляют 1-3% раствор соляной кислоты для растворения хлопьев коагулянта. Полученную смесь отстаивают 18-24 ч, после чего жидкую часть удаляют сифоном, а осадок исследуют на яйца гельминтов. С этой целью осадок тщательно встряхивают и пастеровской пипеткой наносят 1 каплю полученной взвеси на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Исследуют не менее 1 мл осадка, а затем математически пересчитывают на весь его объем. При незначительном загрязнении проб почвы микроскопическому исследованию подлежит весь осадок.

Исследование сточной воды на яйца гельминтов . Пробы сточной воды, взятые на разных этапах ее очистки на очистных сооружениях, наливают в 10-литровые цилиндры и отстаивают 5 мин. Всплывшие на поверхность жидкости плотные примеси удаляют петлей. После 5-минутного отстаивания надосадочную жидкость переливают сифоном в другой большой цилиндр, а осадок удаляют. Полученную жидкую часть сточной воды смешивают в большом цилиндре с коагулянтом и исследуют в дальнейшем по той же методике, что и почву (на этапе добавления коагулянта).
Пробы воды из водопроводной сети и различных водоемов смешивают в большом цилиндре с коагулянтом и исследуют в дальнейшем по той же методике, что и сточную воду.

Исследование осадков сточных вод на яйца гельминтов . Пробы осадков сточных вод отбирают с 5-10 мест по 100 мл, помещают в стеклянные сосуды объемом 1-2 л. Сухие осадки забирают по той же методике, что и почву. Вносят 100-150 мл осадка в центрифужную пробирку объемом 250 мл, центрифугируют в течение 5 мин при 1000 об/мин. Затем жидкую часть сливают, а к осадку добавляют чистую воду до прежнего объема, тщательно размешивают и центрифугируют. Такую промывку осадка повторяют 2-3 раза, после чего к нему добавляют 3-5 г чистого песка и полученную смесь исследуют по той нее методике, что и почву.
Согласно нашим данным, осадок сточных вод исследуют на яйца гельминтов по следующей методике: пробу осадка в количестве 1 л тщательно растирают пестиком в большой фаянсовой ступке, постепенно добавляя к нему 3% раствор натриевого или калиевого основания, а в дальнейшем исследуют по той же методике, что и почву.

Исследование смывов на яйца гельминтов . Объекты внешней среды, подлежащие исследованию, смывают ватными тампонами, смоченными в 1% растворе натриевого основания или в 20% растворе глицерина. Тампоны смывают в центрифужные пробирки 2-3% раствором гидрокарбоната натрия или 1% раствором натриевого основания и центрифугируют. Полученный осадок микроскопируют.

Определение жизнеспособности яиц и личинок гельминтов . Жизнеспособность яиц и личинок гельминтов по внешнему виду определяют при помощи витальных красителей, методов культивирования и постановки биопроб на лабораторных животных.
Под световым микроскопом у мертвых или дегенерирующих яиц гельминтов оболочки разорваны или деформированы, цитоплазма разрыхлена, мутная. При подогревании зрелых яиц аскариды, власоглава, острицы до температуры +37° С личинки этих гельминтов проявляют активную подвижность.

Культивирование яиц и личинок гельминтов . Незрелые яйца аскариды культивируют при температуре +24...+30°С в чашках Петри (влажная камера) в 3% растворе формалина, приготовленном на 0,85% растворе натрия хлорида, а яйца власоглава - в 3% растворе хлористоводородной кислоты при температуре +30...+35°С, яйца остриц -в 0,85% растворе натрия хлорида при температуре Ч-37°С. Чашки Петри 1-2 раза в неделю открывают для аэрации и увлажняют в них фильтровальную бумагу чистой водой. Развитие яиц контролируют 2 раза в неделю по наличию признаков деления протопласта на отдельные бластомеры. В первые дни яйцо развивается до 16 бластомеров, переходящих в стадию морулы (вторая стадия). Если в течение 2-3 мес у янц не наблюдается признаков развития, их следует считать погибшими.



Просмотров